細胞計數(shù)作為醫(yī)學檢驗的常用手段之一，也是細胞學實驗室的一個基本技能。我們想了解細胞的生長情況時，除了直接觀察細胞形態(tài)以外， 繪制細胞生長曲線 、計算細胞倍增時間應(yīng)該就是廣泛采用的評價指標了。 但其實使用血細胞計數(shù)板手工計數(shù)細胞過程十分繁瑣，對實驗者操作者的要求也比較嚴格。

細胞計數(shù)的常見方法主要有手動計數(shù)及自動計數(shù)。本期阿顯為您列舉手工計數(shù)的操作要點以及自動計數(shù)的便捷高效之處，供您按照自身實際情況選擇！

手動計數(shù)操作要點


1.計數(shù)板需要清洗干凈，使其干燥，不能有油脂或者灰塵，蓋玻片亦如此，不干凈的計數(shù)板嚴重影響計數(shù)結(jié)果的準確性。
2.提前預(yù)估細胞量，細胞濃度太低誤差大，細胞濃度太大容易數(shù)花眼。最好使其濃度在0.5-5x106個/mL，也就是每個計數(shù)室50-500個細胞，細胞數(shù)目過多，則需要進一步稀釋；細胞數(shù)目過少，則需要離心再懸浮。
3.盡可能使細胞分離成單個，無團塊無雜質(zhì)；計數(shù)前快速吹打均勻，尤其是多次取樣計數(shù)時更要注意每次都要混勻，操作盡量迅速。
4.細胞液滴加到計數(shù)室再蓋蓋玻片，亦可先蓋玻片，從側(cè)面通過液體毛吸作用到達計數(shù)室，液體太多容易測流到計數(shù)板小溝，細胞容易被流走；液體太少容易在計數(shù)室或者附近形成空泡。如出現(xiàn)以上情況，則需準備細胞和計數(shù)板重新計數(shù)。
5.數(shù)細胞的原則是只數(shù)完整的細胞，若少量細胞聚集成團，只按照一個細胞計算；如果細胞壓在格線上，則只計上線，不計下線，只計右線，不計左線。
6.如果細胞需要臺盼藍染色，必須充分混勻并且不要忘記計算時乘以倍數(shù)；
7.滴加細胞過程中，滴加后移動計數(shù)板以及計數(shù)過程中都要保持計數(shù)板水平不晃動，防止細胞液體側(cè)流帶動細胞流失或者局部聚集。
8.建議細胞計數(shù)板上下兩室都計數(shù)然后取平均或者多次計數(shù)取平均，準確的計數(shù)應(yīng)該是多次計數(shù)結(jié)果差別很小，或者稀釋一定倍數(shù)后計數(shù)結(jié)果依然吻合

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